MSC治療をめぐる議論は「どの細胞を使うか」に集まりがちですが、この解説の主題は「細胞に何をするか」です。採取した細胞をそのまま使うのか、体外で増やして（拡大培養して）から使うのか。この一点が、治療効果・安全性・体内での挙動を大きく分けます。

以降のページでは、培養が①標的へたどり着く力（ホーミング能）、②肺を越えて全身に届く力、③安全性、のそれぞれをどう損なうのかを、順に見ていきます。

ホーミングとは、投与された細胞が血流に乗り、傷んだ組織を見つけてそこに留まる一連の働きを指します。細胞が「行き先を読む」ための中心的なセンサーが、CXCR4という受容体です。

傷ついた組織はCXCL12（SDF-1）という誘引物質を出します。CXCR4はこの信号を受け取る側の受容体で、両者は鍵と鍵穴の関係にあります。CXCR4が働かなければ、細胞は行き先の信号を読めません。だからこそ、培養がCXCR4に与える影響が決定的になります。

この解説は二つの命題を軸に進みます。命題1：ホーミング能は培養で低下する。命題2：CXCR4は培養で失われる。

両者は別々の現象ではなく、分子レベル（CXCR4の喪失）が個体レベル（生着効率の低下）を規定するという因果でつながっています。つまり介入すべき点は「どう投与するか」ではなく「どう作るか（培養するか否か）」にある、という見立てです。次のページ以降で、それぞれの一次的な証拠を示します。

ホーミングは一段階の出来事ではなく、複数の段階が連なるカスケードです。血流中で減速し、血管壁に接着し、内皮をくぐり抜け、組織へ入る。この各段階に、それぞれ別の分子が関わります。

重要なのは、どこか一つの段階が欠けても全体が成立しない点です。CXCR4はこの連鎖の入口にあたり、ここが機能しないと後続の段階に進めません。

新鮮に単離した直後のMSCと、体外で増やしたMSCは、同じ「MSC」という名前でも性質が異なります。培養という工程そのものが、細胞の状態を変えていきます。

変わるのはホーミング能だけではありません。大きさ、分泌するもの、表面のタンパク質、老化の度合い――複数の側面が同時に変化します。次ページ以降で、その一つひとつを具体的な研究とともに見ていきます。

この研究は、同じ系統のマウスを使い、免疫拒絶の影響を排した状態で「新鮮 vs 培養」を直接比べました。結果は明快です。

未培養のMSCは骨髄へ55〜65%生着した一方、わずか24時間の培養で生着率は10%に低下し、48時間の培養では骨髄・脾・リンパ節・胸腺のいずれからも検出されなくなりました。

培養時間が延びるほど生着が失われるという用量反応的な関係は、「培養が原因である」ことを因果として示しています。命題1をこれ以上なく直接的に裏づける一次資料です。

前ページはマウスの研究でしたが、ヒトのMSCでも方向は同じでした。ヒト骨髄由来MSCを免疫不全マウスに投与し、20〜24時間後の分布を調べた研究です。

継代数（培養で植え継いだ回数）が進むほど、骨髄・脾へのホーミングが有意に低下しました。そして最も多く集まった臓器は肺でした。

著者自身が、この継代依存的な低下は先行するマウスの知見（Rombouts 2003）を想起させる、と論文中に明記しています。種を越えて同じ結論に至り、しかも互いを引用している――単発の報告より格段に強い証拠です。

CXCR4が失われる理由は一つではありません。培養環境そのものが発現を抑える、酵素による剥離が受容体を切り落とす、継代に伴う老化、そして受容体が細胞の表面ではなく内部にしまい込まれる――少なくとも四つの独立した経路が関わります。

複数の経路が重なるということは、一つを対策しても残りが効いてしまうということでもあります。「投与法の工夫」で取り戻しにくい理由が、ここにあります。

培養で失われるのはホーミング能に限りません。免疫を調節する力、増殖やクローンを作る力、分化する力、そして分泌するもの（セクレトーム）や表面の性質まで、広く変化します。

とりわけ、前臨床試験では若く高機能な低継代の細胞が使われるのに対し、実際の臨床では高継代の細胞が使われがちです。動物実験で有望だった結果が臨床で再現されにくい一因として、この「使う細胞の質の違い」が指摘されています。

培養を重ねるとMSCは物理的に大きくなります。これは単なる形の変化ではなく、複製老化という不可逆な過程の一部です。継代1〜3では細胞面積は均一ですが、継代を重ねると4倍以上に膨らみ、老化マーカーの上昇と強く相関します。

肥大化は治療効果の低下と直結します。大きくなった細胞は、次に見るように、肺の毛細血管を物理的に通過できなくなるからです。

懸濁した状態での直径を、微小血管の内径（5〜10μm）と並べて比べた図です。

未培養MSC（5〜10μm）は、ちょうど微小血管を通過できる上限にあります。培養MSC（20〜30μm）はこれを超え、高継代・老化MSC（40〜60μm）はさらに大きい。

直径で2〜6倍、断面積では数倍から数十倍の差になります。この差が、微小循環を通り抜けられるか、肺で止まってしまうかを分けます。

静脈内投与された細胞は、最初に肺の毛細血管網を通過しなければなりません。ここが最初の関門です。PET画像を使った定量的な研究では、肺での捕捉を決めているのは細胞の「接着能」ではなく「サイズ」であることが示されています。

接着を弱める操作をしても肺での捕捉は減りませんでしたが、細胞のサイズを小さくすると肺の通過が改善しました。つまり、受容体を回復させても、大きすぎる細胞は物理的に肺を越えられないということです。